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磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)样本的前处理
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)样本的前处理:组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:1、称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。2、将匀浆600g,4℃离心5min。3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。4、上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的α-KGDH(此步可选做)。5、在步骤④的沉淀中加入200uL试剂二和2uL试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声...
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植物维生素K1(VK1)elisa试剂盒 操作步骤
植物维生素K1(VK1)elisa试剂盒操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分...
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犬血纤蛋白原降解产物(FDP)elisa检测试剂盒操作步骤
犬血纤蛋白原降解产物(FDP)elisa检测试剂盒操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取...
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天冬酰胺合成酶(AS)标本要求
天冬酰胺合成酶(AS)标本要求:1.血清:温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。2.血浆:根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或其他作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。3.尿液:无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑...
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人ELISA检测试剂盒样本处理及要求
人ELISA检测试剂盒样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水...
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短古柏线虫探针法荧光定量PCR试剂盒操作步骤
短古柏线虫探针法荧光定量PCR试剂盒操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加...
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小鼠杂交瘤细胞;EphB3培养步骤
小鼠杂交瘤细胞;EphB3培养步骤:一.培养基及培养冻存条件准备:1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022,添加NaHCO31.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L,丙酮酸钠0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。2、培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。二、细胞处理:1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管...
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15脂加氧酶检测试剂盒样本处理及要求
15脂加氧酶检测试剂盒样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水...
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昆虫卵巢细胞;Sf21复苏操作要点
昆虫卵巢细胞;Sf21复苏操作要点:1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过zui易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管...
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牛C反应蛋白(CRP)elisa免疫组化试剂盒操作步骤
牛C反应蛋白(CRP)elisa免疫组化试剂盒操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50...
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β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)注意事项
β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-GA)注意事项:①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。②使用干净的塑料容器配置洗涤液。③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免...
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小鼠SSBelisa检测试剂盒操作步骤
小鼠SSBelisa检测试剂盒操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七...
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